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灭菌的主要办法有哪些？

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2019-10-10
来源：中科检测

　　消毒和灭菌常常放在一起出现，但实际上，它们的定义是不太一样的。消毒是指杀死病原微生物，但不一定包括芽孢。而灭菌则可以杀死物体表面和内部所有微生物，达到无菌的状态。那么常用的灭菌办法有哪些呢？

　　1、温度，利用提高温度，来使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变形，从而达到灭菌作用。而低温则可以起到抑菌作用。

　　温度灭菌又可以分为干热灭菌法和湿热灭菌法。

　　干热灭菌法：

　　① 灼烧灭菌法，利用火焰直接将微生物烧死。优点是简单易行，效果显著。但使用的范围比较有限，容易烧毁物品，只适用于接种针、环、试管口及一些已经不能用的污染物品或实验动物尸体的灭菌。

　　② 干热囧器灭菌法，常用于实验室。把需要灭菌的物品放至烘箱，升温至160℃，持续一小时即可达到显著的灭菌效果。此方法适用于玻璃器皿、金属用具等。

　　湿热灭菌法：

　　温度一致时，湿热灭菌效果优于干热灭菌。一个是因为一旦细胞内蛋白质含水量升高，更容易变形。另一个是因为高温水蒸汽对于蛋白质有极强的穿透力，可以加速蛋白质变形导致死亡。

　　① 巴氏消毒法。巴氏消毒法一般是采用62℃、30分钟进行消毒。不采用更高温度，是因为有的食物会因为高温而破坏营养成分或影响质量，比如牛奶、啤酒等。而这个温度既可以杀死病原微生物，又能保证食物营养和风味不被破坏。

　　② 煮沸消毒法。直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死病原微生物和部分芽孢。如果加入1%碳酸钠或2%石碳酸，效果更佳。该方法适合注射器、毛巾、解剖用具等的消毒。

　　③ 间歇灭菌法。这是一种可以达到良好灭菌效果的方法。在煮沸情况下，虽然能杀死病原微生物，但可能存在部分芽孢不能清除干净。那么我们先将待灭菌的物品加热到100摄氏度，15分钟以上，杀死病原体之后，再冷却放入37摄氏度恒温箱过夜。残留的芽孢在适宜的条件下会萌发成营养体。然后我们继续重复上述步骤，大约三次之后，就可以将细菌连同芽孢清除干净。

　　但这个方法操作比较麻烦，耗费的时间也比较长。

　　④ 加压蒸汽灭菌法。对于耐热、大体积培养基的灭菌，此法效果显著。同时对于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌也适用。

　　具体的方法是将待灭菌的物品放至密闭加压蒸汽灭菌锅中，利用蒸汽加压，提高灭菌锅内蒸汽的沸点。当水温超过120摄氏度时，包括芽孢在内的微生物15分钟左右就可以灭杀干净。

　　需要注意的是，不同微生物对温度的抵抗能力不同。一般而言，50-65℃，10分钟左右即可杀死大部分病毒和营养体。但芽孢抗热能力会更强，比如嗜热脂肪芽孢杆菌，在121℃环境下，要12分钟才会被杀死。而同种微生物，幼龄菌会比老龄菌对热更敏感。

　　而微生物数量多寡，也会影响灭菌效果，数量越多，抗热性越强。

　　另外，培养基的成分和组成也会影响灭菌效果。一般而言，蛋白质、糖或脂肪的存在，会导致细菌抗热性增强。PH在7左右时，抗热性最强。不同盐类对灭菌效果也有一定影响，固体培养基比液体培养基灭菌时间长。

　　2、辐射。辐射消毒灭菌，操作比温度消毒简单，又避免了化学药剂可能造成的二次污染，运用广泛。常常在接种室、手术室、食品、药物包装室等应用。经过辐射后的食品，微生物被大量灭杀，再冷冻保存时，保质期可以大大延长。

　　3、过滤。利用滤孔比细菌还小的筛子，将液体培养基从筛子中过滤，留住微生物细菌，达到除菌的目的。但由于细菌大小不一，未必能过滤干净，存在改善空间。

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