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关于真菌毒素检测方法中的液相色谱及其联用方法介绍

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2021-10-20
来源：中科检测

　　真菌毒素检测的方法很多，从最初以薄层色谱法为主,发展到气相色谱法、高效液相色谱法、免疫学检测技术、快速检测技术等多种方法的普遍应用，涉及仪器分析、化学分析、生物鉴定和免疫分析等方面。本文对新近出现的中药中真菌毒素的检测方法中的液相色谱及其联用方法进行归纳和总结。

　　高效液相色谱方法在20世纪 60年代开始使用，近几年来发展迅速，已成为定量分析真菌毒素的常用方法，其原理是在适宜的色谱条件下，采用固相萃取柱，同时分离检测多种真菌毒素后再通过测量色谱峰的面积计算含量。该方法的优点是特异性强、灵敏度高、定量准确，可同时分离多种真菌毒素，操作简便，适于大批量样品的分析。

　　近年来，高效液相色谱法广泛用于中药中真菌毒素检测，大量实验研究表明，该方法分离效果好，重复性强，最低检出限低，回收率较高，适合中药中真菌毒素检测。张雪辉等3采用免疫亲合柱净化，结合柱后衍生化的高效液相色谱-荧光检测器检测37种常用中药材中的黄曲霉毒素B、Bz、G、G的污染水平，操作简便且灵敏准确，自动化程度高，4种黄曲霉毒素的检出限分别为0.2.0.06、0.2.0.06 ug kg-'。

　　质谱检测技术具有定性能力强、灵敏度高等特点。液相色谱法与质谱检测联用可大大提高分析的灵敏度和可靠性，且可同时进行定性和定量检测，液相色谱与质谱联用检测真菌毒素较薄层色谱法、酶联免疫法具有明显的优势。其分离效能和检测效能高、分析速度快，为同时测定多种毒素提供了条件。

　　中药中赭曲霉毒素A(OTA)含量的高效液相-荧光检测法，且阳性样品采用液质进行确认。中药样品经甲醇/水体系提取，OTA专用免疫亲和柱净化处理后，用荧光检测器进行测定。结果检测限为0.30 ug kg-'，定量限为0.80 ug kg'。在可见明显霉变的31份中药材中，有23份均能检测到OTA，其范围为1.2~158.7 ug kg"'；

　　同时在无明显霉变的26 份中药材中有2份中药材中检测到少量O-TA，其含量分别为2.5 ug kg '和5.7 ug kg'。霉变中药样品中OTA 的检出率相当高，但其含量与发霉程度之间尚未发现明显联系。无霉变的正常中药材样品中OTA的检出率较低，但有一份样品超出限量范围。该方法准确可靠，灵敏度高，成功地应用于中药样品中OTA含量的测定。

　　近来，有关应用液相色谱以及液质联用检测中药中真菌毒素的报道，还有很多。详见下表。