分枝杆菌细胞壁含有大量脂质成分，环境抵抗力显著强于普通细菌，是医疗机构院内感染风险的重要源头，非结核分枝杆菌污染器械引发的感染事件时有发生。消毒产品宣称具备抗分枝杆菌消杀能力，必须通过标准化检测完成效果验证，检测方法是否科学、规范，直接决定消毒产品的安全有效性，关系医疗机构感染防控、消毒产品备案评审、产品上市合规等多个环节。随着消毒行业技术迭代，旧版WS/T327‑2011已经难以适配当下消毒剂、消毒器械多元化的产品形态，2026年6月16日国家疾病预防控制局发布新版行业标准WS/T10054‑2026《分枝杆菌消毒效果评价方法》，将于2026年12月1日正式实施，替代旧版WS/T327‑2011，为分枝杆菌消毒效果检测带来全新技术要求。

　　一、新旧标准整体框架与适用范围变化

　　WS/T327‑2011全称为《消毒剂杀灭分枝杆菌实验评价要求》，主要针对各类消毒剂开展分枝杆菌杀灭效果的实验室评价。新版WS/T10054‑2026重新梳理标准结构，按照GB/T1.1‑2020标准化导则重新编写，新增**基本要求**独立章节，将适用对象拓展为**消毒剂以及产生化学消毒因子的消毒器械**，覆盖产品范围更广。

　　新标准明确，标准包含基本要求、评价方法、评价规定、注意事项以及规范性附录，除实验室悬液、载体浸泡试验外，纳入物体表面模拟现场消毒试验；内镜相关分枝杆菌消毒评价直接引用GB/T38497《内镜消毒效果评价方法》，实现不同场景检测标准的衔接。

　　二、核心技术要点更新，补齐试验管控要求

　　1)新增实验室与试验分类基本要求

　　新标准专门增加第4章基本要求，明确分枝杆菌所有试验操作应当在BSL‑2二级生物安全独立实验室开展。同时对不同产品匹配对应的试验类型：悬液定量杀灭试验适合可稀释消毒剂；载体浸泡定量杀灭试验适配粘稠、冲洗型、原液使用消毒剂；化学因子类消毒器械优先选用载体浸泡定量杀灭试验；模拟现场分为物体表面模拟现场、内镜模拟现场两类试验，企业可以根据产品实际使用场景选择对应检测方案。

　　2)载体种类扩充，贴合真实使用场景

　　旧版标准载体材料相对有限，新版标准扩充载体材质清单，可根据实际消毒对象选用金属、玻璃、滤纸、棉布、聚四氟乙烯等多种载体，载体规格除方形10 mm×10 mm以外，金属载体可选用直径12 mm圆形金属片，特定用途产品允许使用其他形状、材质载体。同时完善载体脱脂处理操作流程，布片、金属、滤纸、模拟内镜载体均明确制作规范，让染菌载体更贴近临床、物体表面真实污染情况。

　　3)有机干扰物分级使用，区分清洁与脏污场景

　　新标准细化有机干扰物使用规则：悬液定量试验，经过清洗、相对清洁的消毒对象采用0.3%牛血清白蛋白；未清洗、污染较重对象采用3.0%牛血清白蛋白；载体浸泡定量杀灭试验统一使用TSB胰蛋白胨大豆肉汤作为有机干扰物。分级设置有机干扰条件，可以模拟不同污染负荷下产品的实际消毒表现，避免理想实验室条件下的效果虚高。

　　4)新增物体表面模拟现场消毒试验

　　这是本次修订重要新增内容。以往标准仅有实验室试验，缺少密闭环境下物体表面模拟现场验证手段。新标准增加物体表面模拟现场消毒试验方法，要求在密闭空间布放不少于10个载体点位，包含最难消毒位置，完成消毒后回收载体进行活菌计数，用来验证消毒剂、化学消毒因子器械在物体表面实际工况下的消杀能力，弥补单纯实验室试验和现场工况之间的差距。

　　三、试验分组、操作与中和剂鉴定规范

　　(1)试验组时间设置规则

　　实验室试验，采用产品说明书最低使用浓度，设置3个作用时间：说明书最短作用时间、最短时间0.5倍、最短时间1.5倍。模拟现场试验选择说明书最低浓度、最短作用时间开展。每次试验同时设置阳性对照组、阴性对照组，阳性对照反映体系初始菌量，阴性对照监控试剂、培养基是否存在污染。

　　试验菌株统一采用龟分枝杆菌脓肿亚种CMCC(B)93326或ATCC19977；菌悬液使用5‑6代菌株，菌悬液现配现用不可过夜；染菌载体回收菌量控制在1×10⁶ CFU/片～5×10⁶ CFU/片。活菌培养采用平皿倾注法，36 ℃±1 ℃条件下培养7 d计数菌落。

　　(2)中和剂鉴定严格区分悬液、载体体系

　　附录B中和剂鉴定试验为规范性要求，必须使用杀菌试验的最高消毒剂浓度开展鉴定。标准明确：**悬液鉴定合格结果可以用于载体试验，但是载体鉴定结果不能直接用于悬液试验**，该条要求可以避免中和不充分造成试验结果失真。鉴定一共设置4组，要求1‑3组菌量接近，组间菌落误差率≤15%，第4组无菌生长，3次重复全部达标，才能判定中和剂合格。

　　四、结果判定指标，明确合格阈值

　　新标准第6章评价规定，明确不同试验的合格判定指标：

　　1.**悬液定量杀灭试验**：回收菌量1×10⁶ CFU/mL～5×10⁶ CFU/mL；最低浓度条件下，最短作用时间以及1.5倍最短作用时间，三次重复杀灭对数值均≥4.00，判定合格。

　　2.**载体浸泡定量杀灭试验**：回收菌量1×10⁶ CFU/片～5×10⁶ CFU/片；说明书浓度，最短作用时间、1.5倍最短作用时间，三次重复杀灭对数值均≥3.00，判定合格。

　　3.**物体表面模拟现场消毒试验**：产品规定最低浓度和最短作用时间，全部样本杀灭对数值≥3.00，判定合格。

　　中科检测是专业的消毒产品检测机构，具备CMA资质，可依据WS/T10054‑2026《分枝杆菌消毒效果评价方法》，开展消毒剂、消毒器械分枝杆菌消毒效果评价检测服务，覆盖悬液定量杀灭试验、载体浸泡定量杀灭试验、物体表面模拟现场消毒试验、中和剂鉴定等全套检测项目，助力消毒企业完成标准切换，为消毒产品合规备案、产品研发验证提供可靠检测数据支撑。