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毒理检测：基因突变试验方法有哪些？
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2021-07-22 - 来源：中科检测
基因突变试验的研究已成为当今生命科学研究的热点之一，检测方法也随之迅速发展。人类细胞癌基因的突变类型已如上所述，对于基因突变试验检测，1985 以前，利用Southern 印迹法，可以筛选出基因的缺失、插入和移码重组等突变形式。对于用该法法不能检测的突变，只能应用复杂费时的DNA 序列测定分析法。
基因突变试验目的是检测产品对体外培养的哺乳动物细胞可否引起基因突变，以对产品的致突变性做出评价。那么常见的基因突变试验检测方法有哪些？中科检测带你科普。
1、基因突变试验方法-焦磷酸测序法
测序法的基本原理是双脱氧终止法，是进行基因突变检测的可靠方法，也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长，灵敏度不高，对环境和操作者有危害，故在临床应用中存在一定的限制。
2、基因突变试验方法-单链构象异构多态分析技术
依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象，构象不同导致电泳的迁移率不同，从而将正常链与突变链分离出来。与测序法相比，灵敏性更高。
3、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术
通过聚合酶链反应扩增出可能包含突变的基因组片段，然后利用限制性内切酶对这些聚合酶链反应片段进行酶切，电泳检测后根据酶切片段的长度差异来判断是否存在突变位点。该法一般用于检测已知的突变位点。
4、基因突变试验方法-探针扩增阻滞突变系统
又称等位基因特异聚合酶链反应，是利用Tap DNA聚合酶缺少3′到5′外切酶活性，聚合酶链反应引物的3′端末位碱基必须与其模板DNA互补才能有效扩增的原理。通过设计适当的引物以检测突变基因。
5、基因突变试验方法-高分辨率溶解曲线分析技术
利用不同长度或不同碱基组成的DNA序列溶解曲线不同的原理，在聚合酶链反应后直接运行高分辨率溶解即可完成对样品突变分析。该技术是一种灵敏度100%的表皮生长因子受体基因突变筛选技术，可用于体细胞突变的检测。
6、基因突变试验方法-高效液相色谱法
该方法是基于发生错配的杂合双链DNA与完全匹配的纯合双链DNA解链特征的差异而进行检测的，可检测出含有单个碱基的置换、插入或缺失的异源双链片段。与测序法相比，该法简单、快速，不仅可用于已知突变的检测，还可用于未知突变的扫描。但只能检查有无突变，不能检测出突变类型，结果判断容易出错。
7、基因突变试验方法-微数字聚合酶链反应
该方法为将样品作大倍数稀释和细分，直至每个细分试样中所含有的待测分子数不超过1个，再将每个细分试样同时在相同条件下聚合酶链反应后，通过基因芯片逐个计数。该方法为绝对定量的方法。
以上就是常见的基因突变试验检测方法，如有毒理检测、基因突变试验等项目问题，欢迎咨询中科检测。
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