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微核试验的种类
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  • 2021-09-09
  • 来源:中科检测
  • 微核试验微核试验的种类微核检测的种类
  微核试验的种类可以分为五大类,下面会对这五个微核试验的种类逐个介绍。


微核试验的种类

 

  常规微核试验

 
  利用细胞生物学方法经显微制片后在显微镜下直接计数待测材料微核率的方法。这是普遍采用的基本方法,可以分为两类:
 
  1)将微核试验材料,在加人待测物质的环境中培养一段时间,染色制片,显微观察计算微核率。
 
  2)直接将受遗传毒理损害生物的相应材料制片,显微观察计算微核率。
 

  细胞分裂阻滞微核分析法

 
  1985年fenech等人建立的方法,用胞质分裂阻滞剂阻断胞质分裂,但是不影响细胞核分裂,有丝分裂细胞呈特殊形态的双核细胞,未发生核分裂的细胞则维持单核细胞形态.检测致突变因素作用后的双核细胞率与双核细胞微核率,可同时获得致突变因素对细胞的遗传毒性损害与对细胞周期影响的信息。
 

  荧光原位杂交试验与DNA探针

 
  荧光原位杂交(Flu-orescenceinsituhybridization,FISH)技术是近年来开展起来的分子生物学新技术。它是使用生物荧光素标记的各类DNA和RNA探针与细胞或组织在玻片上进行原位杂交,被观察的特定DNA片段(或序列)在荧光显微镜下固定在细胞核或染色体的原有部位显示荧光。
 
  利用荧光原位杂交试验可以检测是染色体断裂还是染色体丢失,以及可以判断是哪一条染色体,那一段所产生的微核。目前已成功用于MN实验的DNA探针主要有两类:
 
  第一类:是含DNA重复序列的探针,主要用于检测染色体着丝粒的DNA。
 
  第二类:是含染色体端粒DNA序列的探针,它主要显示染色体臂的存在。
 
  若两种探针结合使用。则可以较为准确地判MN的组成情况,即是染色体段片还是整条染色体,以及各自的数目。
 
  目前,在原位杂交的基础上又发展出了多彩色荧光原位杂交技术,它使用几种不同的荧光素单独或混合标记的探针进行原位杂交,在荧光显微镜下显现不同的颜色,因而可以同时检测间期或中期细胞中的几个特异核酸序列。它能够普遍应用在物理图谱绘制、致突变研究,肿瘤病理和产前诊断等方面。
 

  抗著丝粒抗体染色(CREST染色)

 
  抗着丝粒抗体(Anti一kinetochoreantibodies)是美国学者Moroi及其同事于1980年在硬皮病病人血清中发现的一种自动抗体,这些自动抗体可以通过免疫荧光技术检测到。他们与染色体着丝粒蛋白(抗原)成分相结合。具有较强的特异性。
 
  但是并不全部硬皮病病人的血清中都含有该自动抗体,含该抗体的病人皮肤损害往往并不严重和广泛。但却有显著的CREST征。所以将用该种病人的血清对染色体着丝粒的染色直接称为CREST染色(CRESTstaining)。CREST染色用来区分MN来源(染色体段片还是整条染色体),了解诱导MN的化合物性质(断裂剂还是整倍体剂)。
 

  自动化检测法

 

  一、流式细胞仪检测方法

 
  流式细胞仪(Flowcytometry)检测方法是20世纪70年代发展起来的定量测定细胞和亚细胞成分的方法。流式细胞仪是利用激光束为光源,将待测样品进行荧光染色,然后在液体载体里以单个细胞通过激光束,产生荧光信号并转变为电信号通过仪表显示来达到定量测定的目的。流式细胞仪检测MN有很多优点:
 
  1)检测速度至少比人工读片快40~100倍。
 
  2)减少了人为的主观因素。
 
  3)新型流式细胞仪具有分选功能,对判定为含MN的细胞,可以分类检出并收集在玻片上或试管里,在显微镜下检查验证,以证实其真实性并计算其可置信度。
 

  二、计算机图像分析系统检测

 
  把高分辨力摄像机与计算机结合起来将图像分解为若干点,这就是计算机图像分析系统。再将每个点的图像色差转换为数字信号,储存在计算机里进行各定量参数的计算。从80年代中期开始利用计算机图像分析技术,其检测速度也至少比人工计算快10倍以上,但容易受条件因素影响,还需进一步完善。
 
  以上便是小编为大家总结的微核试验的种类,一共分为五大类。还想要了解更多毒理检测的项目请前往中科检测官网。作为拥有严格质量管控体系,确保检测报告的科学性和权威性的第三方检测机构——中科检测,为全国范围内的用户便捷的服务,满足市场日益增加的检测需求。

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