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动物急性吸入毒性试验方法的分享
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2022-01-24 - 来源：中科检测
1、范围
本标准规定了动物急性吸入毒性试脸的试验目的、定义、试验基本原则、试验方法。
本标准适用于评价气体、挥发性物质或气溶胶／颗粒物等化学品的急性吸入毒性作用。
2、急性吸入毒性试验目的
检侧化学品对实验动物的急性吸人毒性作用和强度，为亚急（慢）性等吸入毒性试脸提供剂量选择的依据。
3、急性吸入毒性试验基本原则
在规定时间内，各试验组动物吸入浓度不同的受试样品，可以通过预试验来选择染毒浓度。检测毒物对动物的毒性反应及死亡情况。在试验中死亡的动物将被验尸，而试验结束时还活着的动物要处死并进行大体解剖。
4、急性吸入毒性试验方法
4. 1 实验动物
健康成年小鼠（18g~22g）或大鼠(180g~220g)，也可选用其他敏感动物。同性别各剂量组个体间体重相差不超过平均体重的20％。在试验前，在试验环境下，动物要不低于适应3d~5d时间。
4. 2剂量设计
根据所选方法的要求，原则上应设4~5个剂量组，每组动物一般为10只，雌雄各半。各剂量组距离大小用受试物毒性大小与动物死亡为宜，一般把组距大、动物数量少进行预试。若受试样品毒性很小，也可使用20只动物（雌雄各半）的一次限量法。一般2000mg/m3，吸入4h，如未引起动物死亡，急性吸入毒性试验就不再进行多个剂量。需要时也可做5000mg/m3，或更高浓度吸入4h，或以可能发生的浓度进行试验。
4. 3染毒
染毒可采用静式染毒法或动式染毒法。
4. 3.1静式染毒法
静式染毒是把实验动物放在规定体积的密闭容器（染毒柜）中，加入一定量的受试样品，并使其挥发，造成试验需要的受试样品浓度的空气，一次吸人性染毒2h或4h。
4. 3.1.1染毒柜的容积以每只染毒小鼠每小时不少于3L空气计，每只大鼠每小时多于30L计。
4. 3.1.2染毒浓度的计算：染毒浓度一般应采用实际侧定浓度。在染毒期间一般可测4~5次，求其平均浓度。在无适当侧试方法时。可用式（1）计算染毒浓度：
c=（a×d/V) ×106· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· · ·· ·（1)式中：
c——染毒浓度，单位为毫克每立方米（mg/m3);
a——加入受试样品的量，单位为毫升（mL);
d——化学品相对密度;
V——染毒柜容积，单位为升（L）。
4. 3.2动式染毒法
动式染毒是采用机械通风装置，把含有一定浓度受试样品的空气连续、均匀不断地送入染毒柜，空气交换量大约为12次／h~15次／h，并排出等量的染毒气体，保持相对固定的染毒浓度（对通过染毒柜的流动气体应不间断地进行监侧，并至少记录2次）。
一次吸入性染毒2h。如果受试化合物有特殊要求，那就应该采用其他的气流速率。染毒时，染毒柜中至少要保证19％的氧含量与均衡分配的染毒气体。
一般而言，为保证染毒柜内空气稳定，试验动物的体积必须小于染毒柜体积的5％。且染毒柜内要保持徽弱的负压，避免受试样品泄露对周围环境造成污染。与此同时，要注意避免受试样品爆炸。
4. 3.2.1受试样品气化（雾化）和输入的常用方法
4. 3.2.1.1气体受试样品，经流量统计与空气混合成一定浓度后，直接输入染毒柜。
4. 3.2.1.2易挥发液体受试样品，挥发后，通过空气鼓泡或适当加热促使输入染毒柜。
4. 3.2.1.3若受试样品现场使用时采取喷雾法时，可以用喷雾器或超声雾化器来让它雾化为气溶胶，然后输入染毒柜。
4. 3.2.2染毒浓度计算
一般情况下，染毒浓度应采用动物呼吸带实际侧定浓度，不低于每半小时一次，取其平均值。各侧定浓度值应在其平均值的25％以内。若无适当的侧试方法，也可采用式（2）计算染毒浓度：
c= [a×d/（V1+ V2) ] ×106· · ·· · ···· · ··· ·· · ·（2)式中：
c——染毒浓度，单位为毫克每立方米（mg/m3);
a——气化或雾化受试样品的量，单位为毫升（mL);
d——受试样品相对密度;
V1——输入染毒柜风量，单位为升（L）。
V2——染毒柜容积，单位为升（L）。
4. 4 观察期限及指标
4. 4.1 观察并记录染毒过程和观察期内的动物中毒和死亡情况。观察期限一般为14d。
4. 4.2 对死亡动物进行尸检。观察期结束后，处死存活动物并进行大体解剖，必耍时，进行病理组织学检查。
5、 试验结果评价
当评价试验结果时，LC50应结合观察到的毒性效应及尸检所见考虑，LC50值是受试样品急性毒性分级和标识以及判定受试样品经呼吸道吸入后引起动物死亡可能性大小的依据。引用LC50值时一定要注明所用实验动物的种属、性别、染毒方式及时间长短、观察期限。
评价应包括动物接触受试样品与动物异常表现（包括行为和临床改变、大体损伤、体重变化、致死效应及其他毒性作用）的发生率和严重程度之间的关系。
以上就是关于动物急性吸入毒性试验方法的介绍，希望对大家有所帮助。
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