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化妆品祛痘功效评价体外测试方法有哪些
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  • 2024-06-24
  • 来源:中科检测

2021年1月1日起施行的《化妆品监督管理条例》规定:化妆品的功效宣称应当有充分的科学依据;化妆品注册人、备案人应当在国务院药品监督管理部门规定的专门网站公布功效宣称所依据的文献资料、研究数据或者产品功效评价资料的摘要,接受社会监督。化妆品功效宣称的科学依据成为行业关注的热点。


痤疮的形成和皮脂腺的调控异常、皮脂腺导管角化过度、痤疮丙酸杆菌等细菌的繁殖和机体的炎症反应与免疫反应密切相关。祛痘护肤品的开发和痤疮形成机制同步,从抑菌、抗炎、控油和促进角质剥脱等多个方面进行。


祛痘护肤品体外功效评价


1.  抑菌——基于痤疮丙酸杆菌的祛痘功效评价


痤疮丙酸杆菌的大量增殖是引起痤疮形成和加重的重要因素之一,那么护肤品若有抑制痤疮丙酸杆菌的作用,则可以一定程度上预防痤疮的形成和抑制痤疮的发展。


测定受试物对痤疮丙酸杆菌的抑制效果可反映其祛痘功效。常见的测试方法为:用微量肉汤稀释法测定最低抑菌浓度,用悬液定量法测定抑菌率,用抑菌圈法(也称扩散法)检测抑菌效果。


图1 抑菌圈实验检测抑菌效果


如图,将抑菌功效按照形成抑菌圈的大小来分级进行评估,用游标卡尺测量抑菌环直径, 按照《WS/T 650—2019》中抑菌环实验的结果判定标准,直径大于7mm者,产品有抑菌作用。抑菌环直径不大于7mm者,产品无抑菌作用。


2.抑制炎症反应——基于巨噬细胞/单核细胞的祛痘功效评价

 

巨噬细胞与单核细胞均为吞噬细胞,参与体内免疫反应;维甲酸为已知的治疗寻常痤疮的药物。在痤疮发生发展中,痤疮丙酸杆菌是诱发局部炎症的重要因素,我们可以利用痤疮丙酸杆菌或LPS刺激,建立特异性痤疮炎症模型,再通过检测细胞活性、细胞形态和细胞分泌炎症因子的情况,来评价护肤品的祛痘功效。


3.控油——基于SZ95细胞/含毛囊皮脂腺的离体皮肤的祛痘功效评价

 

SZ95细胞为永生化的人皮脂腺细胞,其调控皮脂腺分泌皮脂与前文提到的三种核受体密切相关。脂滴是细胞内中性脂的储存场所,与甘油三酯的合成和代谢有着密切的关联,它的数量和大小的逐渐增加是皮脂腺细胞分化的标志。脂滴相关蛋白的免疫组化检测常被用于识别油脂细胞,两类主要的脂滴相关蛋白为PLIN家族及CIDE家族。

 

那么基于SZ95细胞对护肤品的祛痘功效进行评价时,我们可以检测细胞形态,脂滴的数量和大小,还有核受体、脂滴和PPAR等相关基因和蛋白。

 

基于含毛囊皮脂腺的离体人皮肤组织模型的检测:通过表面给药的方式,将样品模拟人体使用过程,均匀涂布于离体人皮肤模型表面,通过检测模型组织形态、脂滴形成、以及皮脂腺相关蛋白含量变化,评估待测化妆品的控油祛痘功效。

 

以上对于祛痘护肤品的体外功效评价方法,适用于前期的原料筛选和化妆品配方开发及改良。


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