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抗菌药物检测指标及方法有哪些
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  • 2024-06-28
  • 来源:中科检测

    抗菌药物一般是指具有杀菌或抑菌活性的药物,包括各种抗生素、磺胺类、咪唑类、硝基咪唑类、喹诺酮类等化学合成药物。抗菌药物检测有哪些指标要求?抗菌药物抗菌活性检测方法有哪些?下面跟着中科检测小编来了解。



    抗菌药物检测指标


    抗菌药物的药效学(PD)主要研究药物对病原体的作用,反映药物的抗微生物效应和临床疗效。


    通过对抗菌药物PD的研究,可以确定抗菌药物对致病菌的抑制或杀灭效果,相关的指标包括最低抑菌浓度、最低杀菌浓度、最低有效浓度、防耐药突变浓度、异质性耐药、联合抑菌指数及血清杀菌效价等。


    抗菌药物检测方法


    目前,临床微生物实验室进行抗菌药物敏感试验的方法主要有纸片扩散法、稀释法(包括琼脂稀释法和肉汤稀释法)、E试验法和自动化仪器法(即商品化的微量稀释法)等。


    1.稀释法


    稀释法药敏试验可用于定量测试某一抗菌药物对某一细菌的体外活性,分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。试验时抗菌药物的浓度通常经过倍比系列稀释,能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度称为MIC。


    一个特定抗菌药物的测试浓度范围应包含能够检测细菌的解释性折点(敏感、耐药)的浓度,同时也应包含质控参考菌株的MIC。


    2.纸片扩散法


    纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种测试菌的琼脂表面上,纸片中的药物在琼脂中扩散,随着扩散距离的增加,抗菌药物的浓度呈对数减少,从而在纸片的周围形成一种浓度梯度。


    在药物扩散的同时,纸片周围抑菌浓度范围内的测试菌不能生长,而抑菌浓度范围外的菌株则继续生长,从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈。不


    同抗菌药物抑菌圈的直径因受药物在琼脂中的扩散速率的影响而不同,抑菌圈的大小可反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小。


    抑菌圈直径的解释标准参照CLSI或EUCAST标准提供的敏感折点和耐药折点,可报告细菌对测试的抗菌药物敏感、中介或耐药,某些抗菌药物只能报告敏感或不敏感,因只有敏感的折点。


    3.自动化仪器法


    根据微量稀释药敏试验的原理,在一块微量稀释板上包含多种抗菌药物(可分为革兰阳性、革兰阴性和真菌等组合),每一种药物包含3~8个稀释梯度,在上述测试卡中加入一定浓度的菌悬液,放入自动的孵育/读数器,经过16~24小时孵育后,用光电比浊法测定其透光率,获取吸光度值(OD)。


    若细菌生长,浊度增加,OD值增大,表示该孔内的抗菌药物不能抑制细菌,反之表示细菌被抑制,以能够抑制细菌生长的最小药物浓度孔为该种抗菌药物对此菌的MIC值。


    有的自动化仪器采用荧光技术测定,大部分菌种都能在5小时内判读MIC值,自动化仪器在读取数值后,经计算机分析比对相应折点得出药物敏感试验结果(S、I、R),经人工或专家系统审核后,可通过LIS传输或打印报告。


    4.E试验法


    E试验法是一种结合稀释法和扩散法原理对微生物药敏试验直接定量的技术。E试条是一条5mm×50mm的无孔试剂载体,一面含有一系列预制的、浓度呈连续指数增长的抗菌药物,另一面有读数和判别的刻度。


    抗菌药物的梯度可覆盖有20个MIC倍比稀释浓度的宽度范围,其斜率和浓度范围对判别有临床意义的MIC范围和折点具有较好的关联。


    将E试条放在细菌接种过的琼脂平板上,经孵育过夜,围绕试条周围出现明显可见椭圆形抑菌圈,抑菌圈的下缘与试条交点的刻度即为测试药抑制细菌的MIC值。CLSI和EUCAST的MIC折点均适用于E试验的结果判读。


    中科检测开展抗菌药物检测服务,具备药物体外抗菌试验资质能力,可以出具CMA、CNAS抗菌活性检测报告,具体检测费用及周期可以咨询中科检测工程师了解。