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药物体外抗菌试验中琼脂扩散法有哪些方法
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  • 2024-06-27
  • 来源:中科检测

    药物体外抗菌试验包括抑菌实验和杀菌实验。抑菌:即抑制微生物的生长繁殖,但不能杀死微生物,在药物除去后微生物又能生长;杀菌:即能杀死微生物,当药物除去后,微生物也不能再生长繁殖。两者并非绝对,只是在一定条件下相对而言。


    琼脂扩散法是常用的药物体外抗菌试验方法,那么琼脂扩散法中有哪些方法类型?下面跟着中科检测小编来了解。



    药物体外抗菌试验琼脂扩散法介绍


    琼脂扩散法原理:


    药物可以在琼脂培养基中自由扩散,形成一定浓度的含药区域。由于各种微生物对不同药物或同一药物不同浓度的敏感性不同,因而形成一定大小的抑菌圈或抑菌距离,根据其大小,可以了解药物的抗菌作用大小或是微生物对试验药物的敏感性。


    琼脂扩散法具有方法简便,技术要求不高,易掌握操作的特点。但精确度不高,一般能用于定性或初步判断其作用的强弱。


    药物体外抗菌试验中琼脂扩散法包括挖沟法和滤纸片法,具体方法步骤如下:


    1、挖沟法:


    在琼脂平板上挖沟,沟两边垂直划线接种各种试验菌,沟内加入药液。


    培养后,根据沟两边所生长的试验菌离沟的距离来判断药物对试验菌的抗菌作用强弱。


    适用于在一个平板上试验一种药物对几种不同试验菌的抗菌作用。


    2、滤纸片法:


    制成含菌平板后,将滤纸片蘸取药液置于平板上,培养后观察结果,量取抑菌圈直径以此判断试验药物抑菌作用的强弱。


    用于新药的初筛及临床的药敏试验。


    药物体外抗菌试验影响因素


    1、试验菌:


    用专门的供应机构提供的标准菌株。


    试验菌应合理保藏,用前加以纯化及生物学特征鉴定。


    所用的试验菌株应处于对数生长期,因此期的微生物对外界因素变化最敏感。


    试验结果的灵敏度在一定程度上与试验菌的接种量成反比关系,故应选用适宜的接种量。


    2、培养基


    抗菌试验的培养基应按试验菌的需求配制,如链球菌常用含血清的肉汤培养基,抗真菌药物试验需用沙氏培养基。


    培养基的酸碱度、电解质、还原性物质等均可影响试验结果,实验时应尽可能排除各种影响实验结果因素的掺入。


    经无菌检查合格。


    3、抗菌药物


    药物的浓度、pH及含有的其他成分均可影响试验结果,特别是中草药制剂往往含有色素、杂质和鞣质等,这些均可造成错误结果,应加注意。


    4、对照试验:


    为精确判断实验结果,试验时应设各种对照,包括试验菌对照、已知药物对照及溶剂和稀释液对照等。