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药物体外抗菌试验常用的方法有哪几种?
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  • 2024-06-27
  • 来源:中科检测

    体外抗菌实验指体外条件下,测定细菌/真菌对测试样品的敏感程度。体外抗菌实验分为抑菌实验和杀菌实验,抑菌实验可测定仅有抑制细菌/真菌生长繁殖而无杀灭作用的测试样品;杀菌实验可测定不仅抑制而且能杀灭细菌/真菌的测试样品。


    药物体外抗菌试验是在体外测定微生物对药物敏感程度的实验,已广泛地应用于科研、生产和临床。如:抗菌药物的筛选、提取过程中的追踪、抗菌谱的测定、药物含量的测定、药物浓度的测定、指导临床用药的药敏实验等。



    药物体外抗菌试验方法


    一、液体连续稀释法


    1、在一系列的试管中用液体培养基将试验药物作连续对倍稀释,使药物的浓度沿试管顺序成倍递减。


    2、再于各管中加入等量的实验菌,经16~24h培养后,与阴性及阳性对照管进行对照观察。


    3、将未长细菌的培养液取出,分别转种琼脂平皿。如培养后重新长出试验菌,说明该药仅有抑菌作用。如无菌生长则可以认为该药物有杀菌作用。


    液体稀释法是一种测定药物的抗菌作用定量方法,较琼脂扩散法精确,因而运用较普遍。


    二、琼脂扩散法


    原理:药物可以在琼脂培养基中自由扩散,形成一定浓度的含药区域。由于各种微生物对不同药物或同一药物不同浓度的敏感性不同,因而形成一定大小的抑菌圈或抑菌距离,根据其大小,可以了解药物的抗菌作用大小或是微生物对试验药物的敏感性。


    1、滤纸片法:


    制成含菌平板后,将滤纸片蘸取药液置于平板上,培养后观察结果,量取抑菌圈直径以此判断试验药物抑菌作用的强弱。


    用于新药的初筛及临床的药敏试验。


    2、挖沟法:


    1、在琼脂平板上挖沟,沟两边垂直划线接种各种试验菌,沟内加入药液。


    2、培养后,根据沟两边所生长的试验菌离沟的距离来判断药物对试验菌的抗菌作用强弱。


    适用于在一个平板上试验一种药物对几种不同试验菌的抗菌作用。


    琼脂扩散法具有方法简便,技术要求不高,易掌握操作的特点。但精确度不高,一般能用于定性或初步判断其作用的强弱。