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体外抗菌试验方法有哪些 体外测定抗菌活性的指标是什么
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  • 2024-06-28
  • 来源:中科检测

    药物体外抗菌试验用途是抗菌药物的筛选、药物的抗菌谱测定及临床药物敏感性试验等方面。药物的体外抗菌试验在实验室进行,优点是方法简便、需时短、用药量少,不需要活的动物、实验条件容易控制。因此,药物的体外抗菌试验已广泛应用各种测定了。


    药物的抗菌试验是为了检查药物的抗菌能力。该项试验方法已广泛应用于新药研究和指导临床用药。如抗菌药物的筛选,提取过程的生物追踪、抗菌谱的测定、耐药谱的测定、药敏试验、药物血浓度测定等各个方面。



    体外抗菌试验方法


    一、杀菌试验


    杀菌试验用以评价药物对微生物的致死活性。


    最低杀菌浓度:指该药物能杀死细菌的最低浓度。从对微生物广义而言,也可称之为最低致死浓度(MLC)。


    1、活菌计数法:


    是在一定浓度的定量药物内加入定量的试验菌,作用一定时间后,取样进行活菌计数,从存活的微生物数计算出药物对微生物的致死率。


    2、石炭酸系数(又称酚系数):


    是以石炭酸为标准,在规定的试验条件下,作用一定时间,将待测的化学消毒剂与石炭酸对伤寒沙门菌或金黄色葡萄球菌的杀菌效力相比较,所得杀菌效力的比值。


    4、棋盘格法:


    是由于在试验时,含两种不同浓度药物的试管排列呈棋盘状而得名,用以评价两种药物同时用不同浓度进行联合试验时的抗菌活性。


    二、体外抑菌试验


    1、连续稀释法色:


    可用于测定药物的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。可以用液体培养基,也可用固体培养基。


    2、琼脂扩散法:


    是利用药物可以在琼脂培养基中扩散,在药物有效浓度的范围内形成抑菌圈或抑菌距离,以抑菌圈直径或抑菌距离的大小来评价药物抗菌作用强弱。


    三、联合抗菌试验


    在药学上作中,常需检验两种抗菌药物在联合应用时的相互作用以及抗菌药物与不同pH值或不同离子溶液的相互影响。如加强药物抗菌作用的为协同;减弱药物作用的为拮抗;相互无影响的为无关;作用为两者之和的为累加。


    体外测定抗菌活性的指标


    体外条件下,用于测定抗菌药物或材料体外抑制细菌生长效力的试验称为抑菌试验。通过抑菌试验,可以测定一个药物或材料的最低抑菌浓度,用以评价该药物或材料的抑菌性能,这是抗菌药物的最基本的药效学数据。主要方法:平板涂布计数、抑菌圈测试、OD值测试、MIC/MBC等。


    体外测定抗菌活性的指标是MIC/MBC。


    MIC(最小抑菌浓度)判定标准:眼观无细菌生长的最低药物浓度确定为MIC。


    MBC(最小杀菌浓度)判定标准:眼观清澈的孔/管摇匀,吸取0.1mL涂布于固体培养基,培养一定时间后计数,菌落数少于5个的最低稀释样品浓度确定为MBC。